1. 分區(qū)明確:嚴(yán)格劃分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。每個(gè)區(qū)域功能獨(dú)立,避免不同操作環(huán)節(jié)之間的交叉污染。例如試劑準(zhǔn)備區(qū)專門用于試劑的準(zhǔn)備與儲(chǔ)存,需保持潔凈,避免引入核酸模板等污染物;樣本制備區(qū)用于樣本的處理,操作過程中可能產(chǎn)生氣溶膠,應(yīng)與其他區(qū)域嚴(yán)格隔離。
2. 單向流程:設(shè)計(jì)合理的人流、物流通道,遵循從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)的單向工作流程。工作人員和實(shí)驗(yàn)物品按此方向流動(dòng),不得逆向返回,防止不同區(qū)域的污染交叉?zhèn)鞑ァ@鐦颖緩臉颖局苽鋮^(qū)處理后,直接流向擴(kuò)增區(qū),避免攜帶擴(kuò)增產(chǎn)物的樣本回流至樣本制備區(qū)。
3. 緩沖間設(shè)置:在不同功能區(qū)之間設(shè)置緩沖間,起到過渡和緩沖作用。緩沖間兩側(cè)的門不能同時(shí)開啟,可有效減少不同區(qū)域間空氣的直接對流,降低污染擴(kuò)散的可能性。如在樣本制備區(qū)與擴(kuò)增區(qū)之間的緩沖間,可防止樣本制備過程中產(chǎn)生的氣溶膠進(jìn)入擴(kuò)增區(qū),影響擴(kuò)增反應(yīng)。